生物磁珠是一種新型的功能化固體載體,其表面包被有活性基團,可以與多種生物活性物質(zhì)發(fā)生偶聯(lián),兼具有液體的流動性和固體磁性材料等特點,在外磁場的作用下可以定向移動和集中,當(dāng)撤去外磁場后,稍加振蕩或抽吸又可均勻分散于液體中,從而使固液相的分離變的十分快捷方便,通過簡單的洗脫可以得到純度很高的靶向物質(zhì)。磁珠全血基因DNA提取試劑盒采用特殊包被的生物磁珠,通過*分離作用的緩沖液系統(tǒng),從全血中分離純化高質(zhì)量核酸。磁珠在一定條件下對目的核酸具有很強的親和力,當(dāng)條件改變時,磁珠釋放吸附的核酸,能夠達到快速分離純化核酸的目的。整個過程不涉及有毒試劑,操作環(huán)境更加便利,提取的核酸純度高、質(zhì)量可靠。使用磁珠全血基因DNA提取試劑盒純化的核酸可適用各種常規(guī)模操作,包括酶切、PCR 文庫建立、分子標(biāo)記。
磁珠全血基因DNA提取試劑盒特點:
1. 耗時少:全血DNA 提取周期在40分鐘左右
2. 操作簡便:提取過程無需離心
3. 無毒無害:試劑中不含有氯仿,酚等有毒物質(zhì)
4. 效果穩(wěn)定:OD260/OD280均在1.7-2.0之間
5. 自動化:可配合國內(nèi)外各類磁棒式核酸提取儀或核酸提取工作站,實現(xiàn)高通量提取
磁珠全血基因DNA提取試劑盒的具體操作:
1. 裂解
取抗凝全血到1.5mLEP 管中,加入BufferA 、BufferB ,混合均勻。然后把EP 管置于恒溫水箱中溫育15——20min 。
2. 結(jié)合
將EP 管從溫育設(shè)備中取出,離心后取上清,加入振蕩混勻的磁珠結(jié)合液,顛倒混勻。將EP 管置于磁力架上進行磁分離,棄廢液(吸凈管蓋及管底殘液)。
3. 洗滌
⑴ 加入洗滌液Ⅰ,點振數(shù)次(若有團狀或絲狀物可增加點振次數(shù)及力度),然后磁分離,吸凈管蓋及管底的殘液;
⑵ 加入洗滌液Ⅱ,點振數(shù)次(若有團狀或絲狀物可增加點振次數(shù)及力度),然后磁分離,吸凈管蓋及管底的殘液;
⑶ 重復(fù)步驟⑵一次;
⑷ 室溫下開蓋干燥。
4. 洗脫
加入洗脫液,放置水浴鍋中溫育后磁分離,小心吸取上清液至新的EP 管中,進行下游實驗。